常見問題

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2018-07-04 哪些情況公司不負責?
(1)用戶未嚴格按照說明書認真進行預測定,或者沒有及時就預測定結果,與公司充分溝通,得到公司研發人員確認的情況下,自行大批量測定,導致測定失敗,造成試劑盒和樣品浪費,公司不能負責。建議用戶認真進行預測定,並且與公司研發人員全麵溝通,得到研發人員確認無誤後,再進行大批量測定。
(2)用戶誤訂、漏訂和多訂試劑盒,以及試劑盒保存不當等,造成檢測不能正常進行,或者浪費,公司不能負責。建議用戶與公司銷售充分溝通,確認所訂試劑盒種類、數量和價格無誤後,再下單。用戶尤其需要注意測定自備儀器是否具備,免得購買試劑盒後,因為缺乏相應儀器設備,而無法測定。
(3)因為用戶課題設計、樣品處理、取樣和樣品保存等,以及儀器設備性能不足、用水質量低、溫度控製不嚴和操作不規範等原因,造成測定結果不可靠,或者不符合預期,公司不能負責。
(4)公司隻對試劑盒質量和來樣檢測數據可靠性負責,不保證測定結果符合用戶預期。
2018-07-04 哪些現象需要及時與公司溝通?
(1)訂購的試劑盒超過一周仍然沒有達到,請與公司銷售人員溝通。
(2)試劑盒外包裝破損,請立即拍照並且要快遞員簽字確認,並且與公司銷售人員聯係。
(3)試劑種類、含量和狀態(粉劑還是液體)與說明書不符,或者漏液,拍照後立即與公司銷售人員聯係,由研發和生產人員調查確認後,進行相應處理,包括重發新試劑盒,或者補發部分試劑。
(4)對說明書存在任何疑問,尤其是操作步驟和計算公式等,與公司銷售人員聯係確認後,再做預測定。
(5)預測定發現的異常,如提取液渾濁、讀數顯著波動、顏色異常、吸光度變化趨勢相反和吸光度幾乎無變化等,或者測定結果不符合預期,及時與公司研發人員聯係,全麵溝通,待研發人員確認無誤後,再開始測定。
2018-07-04 如何解決疑似質量問題?
(1)由於沒有參與用戶實驗設計、樣品處理、取樣和樣品保存以及測定操作,公司隻能對試劑盒質量負責,不能保證用戶自己測定的結果符合用戶預期。
(2)基於同樣理由,公司隻能就收到的樣品提供真實可靠的數據,不能保證來樣檢測的結果符合用戶預期。
(3)對於試劑盒用戶,收到試劑盒後立即進行驗收。如果存在外包裝破損,試劑短缺和試劑狀態存疑等情況,用戶應該及時與公司聯係。公司會針對具體情況,提供補貨和重新發貨等處理。
(4)對於試劑盒用戶,一定要嚴格按照說明書,進行預測定,並且就預測定結果與公司及時進行全麵真實的溝通;公司研發人員會針對用戶提出的問題,進行詳細技術指導,調整測定方法,幫助用戶獲得真實可靠的數據。如果未進行預測定,或者預測定後沒有及時與公司溝通,造成樣品和試劑盒浪費,公司不能負責。
(5)如果懷疑試劑盒質量,請您及時全麵如實地反映相關情況,準確描述發現的問題,以保證研發人員能夠及時找到問題的真正原因,提出解決問題的辦法。隱瞞、推卸責任和爭吵都不能解決問題,隻有坦誠溝通,才能找出問題的真正原因,從而解決問題,得到需要的檢測數據。
2018-07-04 測定值與文獻報導差異很大怎麽辦?
(1)生化測定主要目的是比較處理內和處理間該指標的變化。同時,要測定絕對值,往往是不可能的。因此,追求的不是絕對值而是相對值。
(2)用不同測定方法和不同測定條件下得到的測定值可能存在很大差異。因此,如果測定方法不同,同一樣品的測定值通常是不可以直接比較的。這也是建議使用試劑盒測定的理由之一。因為不同作者用同一試劑盒測定的數據才是可以相互比較的。
(3)同一種材料,不同處理、不同發育狀態和不同器官其生化指標可能發生很大變化。
因此,能夠直接用來比較的文獻資料本來就不多。
(4)如果測定值與文獻報道相差太大,首先應該檢查單位是否一致,包括摩爾還是毫摩爾;是幹重、鮮重還是蛋白質濃度,是分鍾還是秒,等等。其次,檢查計算是否有誤?最後,如果相差不是數量級,通常是很正常的。
2018-07-04 測定結果不符合預期怎麽辦?
(1)首先檢查測定本身是否存在問題。
(2)如果排除了測定本身的問題,那麽依次進一步檢查計算、取樣和樣品處理是否存在問題。
(3)如果計算和取樣沒有問題,那麽隻能修改研究假說。
(4)當然,最好在實驗設計時就選擇測定幾個相關指標,如果相關指標能夠解釋其變化,那麽就接受該結果。ag8亚游集团生物研發的試劑盒分成不同係列,每一個係列中的試劑盒是相互配套的。鑒於生物學問題的複雜性,測定結果與預期不符,從而改變研究假說的事例很多,甚至有時意味著新發現。
2018-07-04 為什麽不同樣品測定值差異不顯著?
(1)該指標在不同樣品間確實無變化。
(2)操作重複性不好,掩蓋了組內和組間差異。後者可以看重複之間吸光度變化的重複性,如果重複之間吸光度變化相差很大,表明主要可能是操作不規範造成的,尤其是加液體積不準確和反應時間控製不準確。
2018-07-04 為什麽同一樣品的平行測定結果差異大?
(1)可能是樣本中色素造成反應體係不均勻、測定指標提取時離心不完全,雜質影響等原因造成。
(2)係統誤差較大,主要與測定儀器的穩定性和操作的精確性有關。在沒有出現(1)的情況下,建議進行同一提取液的3次重複測定,看看它們之間的差異,如果差異大,表明係統誤差大,必須等待儀器穩定(通常需要開機半小時以上儀器才能夠穩定),同時多練習操作,以達到一致。當保證係統誤差很小後,再開始正式測定。
2018-07-04 測定管與對照管為什麽會沒有差異,甚至低於對照管?
(1)如果空白值有點偏高,空白管存在一定的汙染情況;
(2)測定與對照結果幾乎沒有差異;首先樣本具體是什麽,是否樣本自身的含量偏低;再者就是提取步驟,是否按照說明書操作步驟進行,提取的充分程度,如果提取不充分也會導致結果偏低情況。可以考慮將樣本取樣量加大。
2018-07-04 為什麽不顯色?
(1)前處理不當,例如測定酶活性,酶已經失活,包括樣品保存條件不當、使用了導致酶失活的化學試劑和提取方法不當等;
(2)試劑盒保存不當,導致試劑盒中某些試劑失活;
(3)該樣品確實不含有該成分,例如哺乳動物肝髒中葡萄糖激酶替代了己糖激酶,選擇己糖激酶測定試劑盒當然無法測定到活性。
2018-07-04 為什麽△A會出現負值?
(1)可逆反應造成。可以通過適當縮短反應時間來防止逆反應的發生。
(2)體係中發生了別的反應。該反應的底物或者產物在該波長下也有光吸收,並且變化方向相反,超過了希望發生的反應,同樣可以通過設置新的對照排除。
(3)反應體係中存在顆粒或者氣泡。隨著時間延長,顆粒沉澱或者氣泡破裂,會導致吸光度顯著下降,出現負值。主要注意觀察,即可發現是否屬於這種情況。顆粒通常來源於樣品粗提液,可以提供再次離心,確保得到澄清的上清液;當然也可能來自試劑,測定前觀察試劑中是否有沉澱,如果有,一方麵待充分溶解後再用,另一方麵待顆粒沉澱下來後小心吸取上清液。氣泡通常來源於反應本身,可以通過降低反應速度(如減少樣品質量提取液體積比)來防止氣泡產生。
2018-07-04 為什麽△A會接近於零?
表明反應不能發生。
(1)如果是測定酶活性,表明樣品幾乎沒有酶活性;如果是測定某種物質,則表明該樣品幾乎不含有此種物質。
(2)體係中還發生了別的反應,該反應的底物或者產物在該波長下也有光吸收,並且變化方向相反,幾乎抵消了希望的酶反應,可以通過設置新的對照排除。
(3)樣品保存不當。這就需要用戶自己仔細檢查樣品處理、采集和保存以及提取狀況。
(4)試劑盒質量問題。可以換一種完全不同的樣品來驗證,比如去室外隨機采取某種
正常的葉片來測定。如果同樣沒有活性,那表明試劑盒質量問題的可能性很大。請用戶立即聯係公司。
2018-07-04 吸光度特別高怎麽辦?
(1)現在分光光度計或者酶標儀,允許測定的吸光度範圍以及比較寬。如果吸光度沒有超出儀器讀數範圍,就可以正常測定。
(2)吸光度特別高,導致吸光度變化不再符合朗伯比爾定律,同時靈敏度也會降低。
(3)吸光度特別高,可能因為樣品提取液在該波長下有其它強烈吸收的物質,添加的底物濃度高,紫外波長下用的玻璃比色皿,或者普通酶標板,比色皿髒,者比色皿不透光一麵對著光源等。
(4)聯係公司研發人員,根據具體情況,提出應對辦法。
2018-07-04 加完試劑後是如何振蕩混勻的?
使用分光光度計的用戶,可以將反應液加在離心管裏,通過手動混勻或用渦旋振蕩器混勻後馬上轉移到比色皿中檢測。使用酶標儀的用戶,可以將酶標儀在測定開始前設置一個5秒鍾的振蕩程序。
2018-07-04 可以改變說明書中加試劑順序嗎?
絕對不可以,否則可能造成反應不能正常進行,導致測定失敗。強烈建議加完試劑後立即混勻。
2018-07-04 試劑變色後還可以用嗎?
不可以。建議用戶注意避光保存,使用前一定要觀察試劑顏色是否正常。
2018-07-04 按照說明書冷藏後出現沉澱的試劑還可以用嗎?
可以。但是應該在常溫中充分溶解後再用,以免試劑濃度變小,造成測定不可靠。
2018-07-04 試劑盒應該在多長時間內用完?
(1)為了保證測定質量,試劑盒開封後一般應該在一個月內用完。
(2)用戶樣品量大時,可以一次訂購,分批生產和發貨。
(3)特別值得注意的是,出於試劑穩定性考慮,說明書特別標明現配現用的試劑,配製後應該短時間內用完(如2小時),絕對不可以過夜。
(4)為了用戶方便,公司通常分裝成幾個試劑瓶中,用戶可以根據實際測定需要,進行配製。
強烈建議用戶在樣品提取後,準備測定前,再現配現用,防止因為等待時間過長,導致試劑狀態變化,造成測定結果不可靠。
2018-07-04 為什麽有些試劑盒不提供標準品?
(1)為了節約用戶經費,對於測定體係很穩定的試劑盒,研發時建立了標準曲線,在此基礎上提供了計算公式。
(2)有些檢測對象本身就無法購買到標準品。
2018-07-04 UV板和普通酶標板有何區別?
微量法一般使用酶標板,當檢測波長≥340nm時,用一般的酶標板即可,價格便宜,一次性使用當然也可以用UV板代替,隻是有些浪費。當檢測波長<340nm時,須選用區別於一般酶標板的UV酶標板。價格比普通的酶標板貴,但可用洗板機清洗,重複利用。
2018-07-04 比色皿有哪些規格?
(1)常量比色皿,如1mL和3mL等,ag8亚游集团常量法試劑盒都是選用1mL體係,隻能用1mL比色皿,不可以用更大體積的比色皿,否則試劑量不夠,無法正常比色。如果用戶需要,公司可以提供1mL比色皿。
(2)微量比色皿,如0.25mL和0.5mL等,ag8亚游集团微量法試劑盒都是選用0.25 mL比色皿。如果用戶需要,ag8亚游集团公司可以提供0.25mL比色皿。一般客戶都選擇使用酶標儀(需要自備酶標板)。
(3)紫外波長檢測需要石英比色皿,不可以用普通玻璃比色皿。ag8亚游集团公司可以提供石英比色皿。
(4)不同規格的比色皿,其外觀大小是一致的,都是1cm光徑(也有0.5 cm光徑的比色皿,不常見,也可以用,但是計算時要注意修改計算公式),其內容積差異在於壁的厚度。
2018-07-04 常量法和微量法試劑盒能否通用?
同一指標的常量法與微量法試劑盒不可以通用,因為兩者測定體係不同。如果用戶自行改變,公司不能保證測定質量。
2018-07-04 試劑盒規格中是什麽意思?
(1)50T/48S:50T指能夠做50次測定,48S指可以測試48個樣品。如果每個樣品重複測定3次,那麽隻能測定16個樣品。其中有2次測定用於空白管或者對照管。值得特別注意的是,50T/24S中由於每個樣品測定都需要做對照,因此能夠測定樣品的數量僅為8個(假設做3次重複)
(2)100T/96S:100T指能夠做100次測定,96S指可以測定96個樣品,如果每個樣品重複測定3次,那麽隻能測定32個樣品。其中有4次測定用於空白管或者對照管。
注意由於瓶璧和移液器吸附等,通常要比理論測定次數少1~3次。其它規格的含義依次類推。值得特別注意的是,100T/48S中由於每個樣品測定都需要做對照,因此能夠測定樣品的數量僅為16個(假設做3次重複)。
2018-07-04 試劑盒有哪些常見規格?
(1)50管的試劑盒,常量法試劑盒,用分光光度計檢測。1mL的比色皿檢測。
(2)100管的試劑盒,微量法試劑盒,用酶標儀(酶標板)或者分光光度計(0.25 mL比色皿)檢測。
2018-07-04 用戶可以自行進行哪些調整?
(1)原則上用戶必須嚴格按照說明書進行規範操作,尤其是反應體係中各試劑體積和加入順序以及測定步驟,才能保證測定結果可靠。
(2)樣品質量:提取液體積比,用戶可以根據預測定結果自行調整,測定結果偏低,可以適當加大上述比值,測定結果偏高,可以適當減小上述比值。但是同一批樣品測定應該保持同樣的上述比值。
(3)反應時間,用戶可以根據預測定結果自行調整,原則是吸光度變化必須保持線性。吸光度變化偏小,可以適當延長反應時間;吸光度變化偏大,可以適當縮短反應時間。但是,同一批樣品測定應該保持同樣的反應時間。
(4)數據的單位,用戶可以根據數據大小和習慣表達方式,進行適當調整,包括摩爾單位、時間單位和質量單位等,通常應該保證數據在小數點前三位和小數點後三位。
(5)同一研究的一批指標,應該調整為同樣的單位,從而可以進行比較,便於分析。例如,物質濃度應該都用摩爾係列的單位,酶活性都用摩爾濃度/單位毫克蛋白質/單位時間,等等。
2018-07-04 如何提高測定質量?
(1)及時核對試劑盒中試劑數量和狀態,有疑問及時與公司研發人員溝通,並且分類保存,不宜保存時間過長。
(2)測定前認真閱讀說明書,就有疑問的地方,及時與公司研發人員溝通,並且確認。
(3)嚴格按照說明書規範操作,做好預測定;並且就預測定結果,及時與公司研發人員全麵溝通(包括樣品種類、樣品保存狀況、有無特殊處理、某些試劑需要現用現配、操作是否規範、儀器工作狀態、用水與用品有無汙染、測定中有無異常和測定結果是否正常等)。
(4)待公司研發人員確認檢測方法和操作沒有疑問後,再開始大批量測定。
2018-07-04 如何保證測定溫度?
(1)根據說明書中指定測定溫度,提前打開保溫設備(如水浴鍋),設到指定溫度,在達到指定溫度後,把冷藏的試劑轉移到保溫設備中保溫30分鍾以上,以保證反應一開始,就在指定溫度中進行。
(2)對於擁有酶標儀的用戶,直接提前預熱,在達到設定溫度後,可以直接把預熱後的試劑,加入酶標板,然後開始反應。
(3)在保溫設備(水浴鍋和金屬浴,最好是後者)進行。注意提前對保溫設備進行預熱,達到設定溫度後再進行反應。但是僅適用於能夠終止的反應。
(4)對於瞬間完成的反應,或者對溫度不敏感的反應,為了提高重複性,最好在同一溫度下完成檢測。例如打開空調,設定在室溫,如25℃。當然,所有控溫設備,都要進行預熱。
2018-07-04 樣本如何稀釋或濃縮?
樣本測定值若超出檢測範圍,可以將提取的上清液用提取液稀釋後重新測定。一般從高到低,按照2倍,5倍,10倍,20倍的順序,選擇一個合適的稀釋倍數。樣本測定值若低於檢測範圍,可以提高樣本濃度,如稱取0.2g樣本加入1mL提取液勻漿,相當於將樣本濃縮2倍。
2018-07-04 測定前是如何調零?
使用分光光度計的用戶,用蒸餾水或去離子水直接調零。使用酶標儀的用戶,可以在一個孔裏加入200μL的蒸餾水或去離子水,作為調零孔。
2018-07-04 樣本研磨時勻漿可以用液氮嗎?
一般情況下將研缽置於冰盒上勻漿即可(冰浴勻漿),用液氮勻漿也可以,但是液氮勻漿會反複凍融,研磨起來比較費勁,同時要做好保護措施,防止凍傷手指。
2018-07-04 土壤酶活性測定可以用鮮土嗎?
由於土壤顆粒大小不一致導致水分含量不一樣,且取樣量較少,為了保證測定的重複性,建議將鮮土37℃風幹24h後取樣。若用鮮土測定,需保證樣本的顆粒大小一致,建議過40目篩後取樣。
2018-07-04 待測樣本必須是鮮樣的嗎?冷凍樣本是否可以用?
新鮮樣本和冷凍樣本都可用於大多數指標的測定,有一些生理活性物質容易降解,建議用新鮮樣本測定,如輔酶Ⅰ、輔酶Ⅱ、穀胱甘肽等。
2018-07-04 如何進行預測定?
(1)務必在7個工作日內進行預測定,以確定該試劑盒是否適合您的樣品,以免造成試劑盒和樣品的浪費。
(2)選擇2~3個預期差異比較大的樣品,嚴格按照說明書進行操作,注意儀器工作狀態,操作規範,控製好測定條件,尤其是溫度。
(3)如實與公司銷售溝通預測定結果,公司研發人員會確認測定結果是否正常,是否需要調整,如何進行調整,從而確保您的測定結果可靠。
2018-07-04 如何防止試劑盒失效?
(1)訂購日期。在打算進行測定的日期,提前一周左右訂購。通常下單後24小時內即可發貨,一般最多5個工作日即可送達。通常開封後一月內用完試劑盒,不要過早訂購,以免試劑盒失效。
(2)留下手機號碼,以便快遞及時通知取貨。尤其是節假日,一定要保證通訊暢通,防止沒人收貨。
(3)收到試劑盒後,檢查外包裝是否正常。馬上打開,按照試劑盒說明書核對試劑數量是否正確,注意瓶中試劑狀態是否與說明書一致。如果有問題,或者懷疑,馬上聯係公司銷售,進行確認。如果沒有問題,請務必按照說明書進行試劑的保存。注意,不同試劑,可能需要分別保存在常溫(25℃)、4oC和-20oC,務必分別按照要求保存,不要整個試劑盒塞到冰箱中。
2018-07-04 如何省錢?
(1)防止誤購,參見3。誤購最浪費。
(2)做好預測定。選擇2~3個預期差異比較大的樣品,嚴格按照試劑盒說明書,進行預測定,並且就預測定結果,與公司銷售溝通,確認無誤後,再進行正式測定。以免因為材料的特殊性或者試劑盒質量以及操作不規範,造成測定結果不可靠,導致試劑盒和樣品的浪費。
(3)如果待測定樣品數量很多,建議分批購買試劑盒,以免因為保存時間過長,導致試劑盒失效,造成浪費。
(4)如果不知道指標變化的可能拐點,可以小間隔取樣,但是先大間隔測定,待發現拐點所在區域後,再圍繞其進行小間隔密集測定,找到真正的拐點。這樣可以顯著減少測定次數,節約經費。
2018-07-04 如何防止漏購?
(1)同一係列試劑盒中不同指標存在相關性,為了得出明確結論,應該盡可能購買和測定所有相關指標的試劑盒。不要因為少測定了其中一個或者幾個指標,導致無法得出明確結論,從而降低論文質量和發表檔次。
(2)不要為了省錢,減少測定的重複次數,從而導致結論不可靠。一般要求同一樣品的同一指標測定重複三次。
(3)根據樣品數量和重複次數(至少三次)以及試劑盒規格,計算所需試劑盒個數,試劑盒個數=樣品總數×三次重複÷每個試劑盒能夠測定的次數。個別測定數據存在疑問時,往往需要再次測定,以排除疑問。往往需要在計算的數量上再加20%左右,避免再次購買試劑盒,耽誤實驗進程。
2018-07-04 如何防止錯購?
(1)查閱相關文獻。看看文獻中是否有你所研究材料中測定該指標的報道。如果有,那麽就可以選購該試劑盒。如果沒有,參閱(2)來判斷。
(2)從基本代謝的角度考慮。如果是基本代謝的相關指標,即使沒有相關報道,你也可以選購該試劑盒。
(3)想測定新指標。如果(1)和(2)都不滿足,你就是想測測看,也許能夠有新意,或者新發現,那麽也可以選購該試劑盒。
(4)注意測定自備用品,尤其是儀器設備。請谘詢公司銷售人員,詳細了解所需儀器設備。如果不具備相關儀器設備,那麽不能選購該試劑盒。
2018-07-04 如何選擇試劑盒?
(1)選擇同一係列的指標,以保證測定結果相互配合,得出明確的研究結論。
(2)盡可能選擇同一家生產商生產的不同試劑盒,以保證質量和服務標準的一致性,也減少采購、售後和報銷的麻煩。
(3)選擇口碑比較好的生產商,不要過於看重價格。否則因為質量和服務問題,導致測定失敗,耽誤論文發表和結題。
2018-07-04 為什麽要用試劑盒?
(1)省時省力省心,因為試劑盒拿來就可以使用,效率顯著提高。
(2)測定結果有保證,因為測定方法、體係、步驟和條件都已經完善。
(3)不同研究者的測定結果可以相互比較,因為都是用的同一種試劑盒。
(4)寫材料與方法時簡單,容易通過專家審稿。
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